Metoda identifikacije tog sloja
Uzmite 0,5 g epimedium ljekovitog bilja u prahu ili odgovarajuću količinu ekstrakta, dodajte 10 ml etanola, uronite 30 minuta, filtrirajte i isparite filtratom. Dodajte 1 ml etanola da se otopi ostatak, što je ispitna otopina. Referentna supstanca icarina je izmjerena, otopljena u metanolu i razrijeđena na 0,1 mg / ml, što je referentna otopina. Na svaku od ispitivanih otopina i referentne otopine pipetirajte 10 jal svakog od ispitivanih otopina i referentne otopine na silikagelnoj tankoslojnoj ploči iste natrijeve karboksimetilceluloze kao veziva, sa smjesom etil acetat-butanon-mravlja kiselina-voda (10: 1: 1 : 1) kao agens koji se razvija, odmotan, izvađen, sušen na zraku i stavljen u UV svjetiljku (365 nm) za ispitivanje. U kromatogramu ispitnog uzorka pojavljuje se tamno crveno mjesto na položaju koji odgovara kromatogramu referentne tvari; raspršena trikloriranjem Aluminijska otopina za ispitivanje ponovo je nanesena UV lampom (365 nm) da bi se otkrila ista narančasto-crvena fluorescentna točka.
2. Spektrofotometrijsko određivanje ukupnih flavonoida u Epimediumu i njegovim ekstraktima
Referentni produkt icariin je točno izmjeren i formuliran u standardnu otopinu od 10 ug / ml metanolom. Ispitujte točno količinu praha ovog proizvoda (ekvivalentna 1 mg icariina), sonatizirajte s 25 ml metanola kroz 30 minuta, razrijedite u volumetrijsku tikvicu od 50 ml, filtrirajte s mikroporoznom membranom od 0.45 μm, tj. Testirati otopinu proizvoda. Testna otopina i referentna otopina uzeta su odvojeno, a apsorbancija je izmjerena na valnoj duljini od 270 nm s reagensom kao prahom, i dobiven je izračun.
3. Određivanje icariina u Epimediumu i njegovom ekstraktu pomoću HPLC
Kromatografski uvjeti i ispitivanje prikladnosti sustava: stupac ODS2 5u C18 (4mm x 150mm); mobilna faza: acetonitril-voda (30:70); detekcijska valna duljina: 270 nm; brzina protoka: 0,8 ml / min. Broj teorijskih ploča nije manji od 1500, na temelju icariina.
Priprema referentne otopine: referentni produkt icariin je točno izmjeren, i otopina od 0.1 mg / ml je pripremljena s metanolom.
Priprema ispitne otopine: točno vagati odgovarajuću količinu praha ovog proizvoda (ekvivalentna oko 1 mg icariina), sonika s metanolom 25 ml tijekom 30 minuta, razrijediti do 50 ml volumetrijske tikvice, upotrijebiti mikroporozni filter od 0.45 um. Membranski filtriranje je ispitna otopina.
Metoda ispitivanja: 10 μl svake otopine uzorka i referentne otopine ubrizgano je u HPLC instrument, a područje je izračunato vanjskim standardnim postupkom.